產(chǎn)品目錄
  • 細胞培養(yǎng)進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規(guī)PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環(huán)境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養(yǎng)基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監(jiān)測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產(chǎn)品
    DNA污染監(jiān)測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產(chǎn)品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測
歡迎來到 威正翔禹|締一生物官方網(wǎng)站|咨詢熱線:400-166-8600
咨詢熱線
400-166-8600

產(chǎn)品目錄
  • 細胞培養(yǎng)進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規(guī)PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環(huán)境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養(yǎng)基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監(jiān)測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產(chǎn)品
    DNA污染監(jiān)測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產(chǎn)品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測

支原體常規(guī)檢測方法匯總(二)

2021-11-23 16:15來源:威正翔禹|締一生物

大家晚上好!

上周我們一起討論了基于Venor?Gem qEP試劑盒的支原體qPCR經(jīng)典檢測法,也是目前使用比較廣泛的方法之一。

當然啦,關于支原體的檢測,方法眾多。今天我們就來了解一下,操作相對更簡單的“一步法”。該方法會用到Minerva Biolabs公司的另一種試劑盒——VenorGeM? OneStep,它與上周介紹的經(jīng)典法試劑盒類似,都是利用了熒光定量PCR的基本原理。


(前情提要在這里,戳戳下方圖片傳送到經(jīng)典法支原體檢測試劑盒詳解)

不同的是,“一步法”試劑盒中,直接將內控添加到預混液中,使用起來更加方便、節(jié)省時間

下面我們就來詳細介紹一下VenorGeM? OneStep支原體檢測試劑盒



使用方法




// 步驟


與經(jīng)典法大致相同:


樣品處理?試劑制備?體系建立?啟動PCR反應?結果判定


樣品處理:


100μl左右的細胞上清液


95℃孵育后離心,取適量用于后續(xù)qPCR。



細胞培養(yǎng)樣品易含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原體DNA。因而推薦進行樣品穩(wěn)定化處理



試劑制備:


將緩沖液、預混液、陽性對照等試劑按照說明書要求,該離心的離心、該混合的混合,處理好后扣緊蓋子備用。


PCR體系建立:


在PCR管中,根據(jù)需要,加入樣品、陽性對照、新鮮培養(yǎng)基(陰性對照),并且設置好重復孔,蓋好蓋子,震蕩混勻。



啟動PCR反應:


按照所需參數(shù),設置好PCR儀,啟動程序(具體參數(shù)詳見產(chǎn)品使用說明或是締一生物官方網(wǎng)站,點擊下方閱讀原文即可)



FAM通道:檢測支原體熒光信號。

HEX通道:檢測內控對照熒光信號

支原體DNA和內控DNA,存在信號之間的競爭性抑制

支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號越高

檢測內控對照的HEX信號通道信號越低。

定量需要基于Ct值和DNA標準曲線

Ct<40為陽性結果。Ct≥40為陰性結果。




小結:


總的來說,一步法試劑盒是經(jīng)典版試劑盒的升級版


在以下幾個方面都是相同的:


都具有高特異性:一次即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種(包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體)。與細菌和真核DNA無交叉反應。


都具有高靈敏度:最高檢測限可達到10CFU/ml。


③都具有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證


④都有相應配套的支原體絕對定量標準品,便于最后定量檢測


不同之處在于,一步法試劑盒省去了配置內控對照的環(huán)節(jié),為實驗人員節(jié)省了寶貴時間,但相應的,價格也會比經(jīng)典法試劑盒高出一部分。



如果你對本公司產(chǎn)品感興趣,想要了解更多,歡迎訪問

北京締一生物官網(wǎng):www.dyshengwu.com

或聯(lián)系北京締一生物公司

咨詢熱線:

400-166-8600

010-84118494

021-64186645

13811167915

咨詢QQ: 1580434811

咨詢QQ: 1258888686

客服郵箱:servicebj@viansaga.com

客服郵箱:servicesh@viansaga.com



聲明:本網(wǎng)站所有注明“來源:締一生物”的內容,版權均屬于北京締一生物網(wǎng)站所有,受到知識產(chǎn)權的法律保護。如需引用、轉載,須注明來源及原文鏈接。如內容涉及實質性修改,須來電獲取書面授權,且轉載時,須注明“來源:締一生物”。

最終解釋權歸締一生物所有。



主站蜘蛛池模板: 南和县| 舒兰市| 博客| 福贡县| 广饶县| 惠安县| 临武县| 婺源县| 绥中县| 南投县| 珠海市| 将乐县| 建始县| 东辽县| 永定县| 沁水县| 梁平县| 文化| 璧山县| 克拉玛依市| 交城县| 乌恰县| 家居| 天津市| 综艺| 禄劝| 宝清县| 灌云县| 大田县| 安泽县| 九江县| 绥芬河市| 都昌县| 襄汾县| 泽库县| 大新县| 池州市| 兴城市| 延寿县| 黄浦区| 黎平县|