方法驗(yàn)證用100CFU?支原體標(biāo)準(zhǔn)品

支原體核酸檢測(cè)法（常規(guī)PCR、熒光定量PCR）應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物制藥工業(yè)和細(xì)胞治療領(lǐng)域具有很多優(yōu)勢(shì)。和傳統(tǒng)方法比較，它具有

①靈敏度高，特異性好。

②時(shí)間短，2-3小時(shí)出結(jié)果。

③操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，可替代傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和DNA染色法。

歐洲藥典（EP 2.6.7）規(guī)定，支原體核酸法如要替代【指示細(xì)胞培養(yǎng)法】（又稱為DNA染色法），需要驗(yàn)證核酸法靈敏度達(dá)到100CFU/ml，并根據(jù)支原體污染發(fā)生的頻率，推薦選擇下列9種支原體進(jìn)行檢測(cè)：

• 精氨酸支原體

• 口腔支原體

• 雞敗血支原體

• 肺炎支原體

• 關(guān)節(jié)液支原體

• 發(fā)酵支原體

• 豬鼻支原體

• 萊氏無(wú)膽甾原體

• 檸檬螺原體

據(jù)小編市場(chǎng)調(diào)查后發(fā)現(xiàn)，德國(guó)MB公司（全稱Minerva Biolabs）生產(chǎn)的【100CFUTM靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品】廣泛被國(guó)內(nèi)外各大藥廠用于支原體核酸法的方法學(xué)驗(yàn)證，被稱為該領(lǐng)域的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

產(chǎn)品介紹

【100CFUTM靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品】為凍干粉形式，一共有10種（見(jiàn)下表），其中涵蓋了歐洲藥典（EP 2.6.7）列舉的9個(gè)支原體物種，可用于qPCR和PCR方法的靈敏度以及耐用性驗(yàn)證，使得核酸法可作為DNA染色法的替代方法。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1.來(lái)自英國(guó)菌種保藏中心NCTC，為標(biāo)準(zhǔn)支原體株。

2.支原體已滅活，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室造成污染，保障細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室安全。

3.傳代次數(shù)少，支原體無(wú)變異。

4.產(chǎn)品為凍干粉，保證其穩(wěn)定性。

5.分析證書（COA）提供該批次GU：CFU比值（支原體基因組/菌落數(shù)比值）。

注意事項(xiàng)

1.使用時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵循說(shuō)明書操作流程。任何偏離可能會(huì)造成結(jié)果誤差。

2.加入100CFU標(biāo)準(zhǔn)品的樣品不能超濾濃縮，否則會(huì)導(dǎo)致結(jié)果不可靠。

3.標(biāo)準(zhǔn)品不建議稀釋。

使用說(shuō)明

試劑使用前，先達(dá)到室溫平衡。

1.標(biāo)準(zhǔn)品管離心，以收集凍干粉至管底。

2.每管加入1ml樣品基質(zhì)液。

3.室溫靜置5分鐘。

4.渦旋振蕩10秒鐘，再離心5秒鐘。

5.使用合適體積的標(biāo)準(zhǔn)品用于DNA抽提。推薦使用MB公司生產(chǎn)的支原體DNA提取試劑盒（品名：Venor?GeM Sample Preparation Kit）。

6.使用合適體積的抽提DNA用于PCR擴(kuò)增。

陰性對(duì)照樣品的制備，步驟同上。推薦適當(dāng)重復(fù)試驗(yàn)，并推薦使用MB公司的常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒 (品名：Venor?GeM Classic，貨號(hào):

11-1025/-1050/-1100/-1250) 或qPCR試劑盒 (品名：Venor?GeM qEP，貨號(hào):

11-9025/-9100/-9250)。

德國(guó)MB公司簡(jiǎn)介

德國(guó)MB公司，全稱Minerva Biolabs，是世界**的微生物污染控制公司，成立于1999年，

總部位于德國(guó)柏林。

公司創(chuàng)始人來(lái)自于全球聞名的羅伯特?科赫微生物研究所。

二十年來(lái)，MB公司專注于微生物污染檢測(cè)與清除，

特別是支原體和軍團(tuán)菌的技術(shù)和產(chǎn)品，在世界上遙遙領(lǐng)先。

自1999年起即研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)和生物藥工業(yè)用QC檢測(cè)試劑

配備生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室

GMP級(jí)潔凈車間生產(chǎn)

世界**的支原體PCR檢測(cè)試劑供應(yīng)商

IOM和PDA成員

ISO 9001和ISO 13485認(rèn)證

注：IOM全稱Institute of Medicine

PDA全稱Parenteral Drug Association