預(yù)防和清除支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)方法

3.對抗生素部分耐藥。

4.只有支原體對抗生素耐藥。

最后一種情況是最差的，因?yàn)?/span>支原體可以通過氣溶膠傳播。在抗生素敏感的情況下，抗生素能防止細(xì)菌和真菌繁殖，但從一開始就沒有能力預(yù)防支原體。因此，在細(xì)胞培養(yǎng)中長時間連續(xù)使用抗生素，不僅是沒有幫助的，而且也會引起很多的問題。然而，在原代培養(yǎng)中，短期（前兩周）使用抗生素（青霉素/鏈霉素），是至關(guān)重要的。因?yàn)榭股卦谂囵B(yǎng)基中不穩(wěn)定，強(qiáng)烈建議每隔兩三天進(jìn)行一次換液。

丟棄或治療支原體污染的細(xì)胞

如果被支原體污染的細(xì)胞較為珍貴或稀少，建議進(jìn)行清除支原體的治療。否則，建議丟棄支原體污染的細(xì)胞，因?yàn)樗鼈儽徽J(rèn)為是實(shí)驗(yàn)室污染的來源。

被污染的細(xì)胞應(yīng)該丟棄，以避免成為污染源。但對于珍貴的細(xì)胞，可使用Minerva Biolabs公司的Mynox Gold?支原體清除劑。Mynox Gold?支原體清除劑是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌，可與支原體膜特異性結(jié)合，破壞膜通透性，導(dǎo)致支原體膨脹破裂而死。使用Mynox?一般在2-3個小時即可完成清除任務(wù)。

隔離任何來源的新細(xì)胞

正如前面章節(jié)中描述，從其他實(shí)驗(yàn)室?guī)淼男录?xì)胞是污染的主要來源。因此，在新細(xì)胞作任何用途之前，有必要隔離細(xì)胞，并檢查是否有支原體污染。

減少氣溶膠的產(chǎn)生

在生物安全柜或細(xì)胞培養(yǎng)箱中細(xì)胞操作產(chǎn)生的氣溶膠，以及人員自身產(chǎn)生的氣溶膠，在實(shí)驗(yàn)室中都會傳播支原體污染。因此，避免產(chǎn)生氣溶膠的活動有助于預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。

支原體檢查的重要性

根據(jù)一些報(bào)告，在美國和歐洲，正在培養(yǎng)的細(xì)胞或細(xì)胞庫凍存的細(xì)胞中，支原體污染的幾率大約是15%至35%。因此，經(jīng)常進(jìn)行支原體檢查是非常必要的。

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英文原文：

Methods for prevention of mycoplasma contamination in cell culture

Improve aseptic techniques and practices

A precise supervision of new workers in the lab by a skilled operator to follow good aseptic techniques can help to reduce the risk of mycoplasma contamination. It is highly recommended to prepare the reports of all cell contamination incidents to solve the problem of contamination .

Test cultures for contamination